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Celltac

全自动血细胞分析仪

Celltac

数据说明

Celltac临床数据手册

监修

东京大学医学部附属医院
检查部 血液形态检查室

常名 政弘

前 言

近年来,医疗技术进步明显,自动化和系统化在临床诊断领域也在不断发展,并且通过自动检测设备可以在短时间内获得大量检查结果。但是,在血液学检查中存在难以自动化的形态学检查。负责临床检查的技术人员的知识和经验会对检查结果的质量产生很大影响,在此我们希望担当检查的负责人能够不断努力,提高形态学方面的技能。
基于这一背景情况,自动血细胞分析仪通过数值结果以及从直方图和散点图中获得的信息,可以用于形态学检查中的筛选。
在本手册中,为了说明Celltac的测量数据,我们通过直方图和散点图对其检测原理和标志信息进行了说明。此外,每个病例都配有细胞照片和形态学观察,这不仅可以用于识别检查结果中的异常情况,还可以用作教育材料。我们希望本手册能够为临床实验室的日常工作提供一定帮助,并有助于提高工作效率。

1. Celltac的白细胞5分类分析 
1.1 Celltac的流式细胞术原理 
1.2 通过散点图进行的白细胞5分类 
1.3 标志与符号标记 
2. 散点图和血细胞形态 
2.1 正常样本的测量示例与布局范例
2.2 造血干细胞的分化和成熟
3. 白细胞增多
3.1 中性粒细胞增多
3.2 淋巴细胞增多 
3.3 单核细胞增多
3.4 嗜碱性粒细胞增多
3.5 出现异型淋巴细胞 
4. 髓系异常
4.1 关于急性白血病的分类 
4.2 急性髓系白血病 AML-M0
4.3 急性髓系白血病 AML-M1
4.4 急性髓系白血病 AML-M2
4.5 急性髓系白血病 AML-M3(APL)
4.6 急性髓系白血病 AML-M4
4.7 急性髓系白血病 AML-M5b
4.8 急性髓系白血病 AML-M6
4.9 急性髓系白血病 AML-M7
4.10 慢性髓系白血病 
4.11 慢性粒单核细胞白血病
4.12 原发性骨髓纤维化 

目  录

4.13 骨髓增生异常综合征 MDS RCMD
(有环形铁粒幼细胞)
4.14 骨髓增生异常综合征 MDS RAEB-1
4.15 骨髓增生异常综合征 MDS RAEB-2
4.16 骨髓增生异常综合征 MDS RAEB-2
(有环形铁粒幼细胞)
5. 淋巴细胞系异常
5.1 B细胞急性淋巴细胞白血病
5.2 T细胞急性淋巴细胞白血病
5.3 慢性淋巴细胞白血病
5.4 塞扎里综合征
5.5 滤泡性淋巴瘤
5.6 伯基特淋巴瘤
5.7 大颗粒淋巴细胞增多的病例
(在慢性髓系白血病治疗期间)
6. 其他异常(红细胞系)
6.1 红细胞缗钱状形成
6.2 出现破碎红细胞
6.3 缺铁性贫血
6.4 巨幼红细胞性贫血
6.5 地中海贫血
7. 其他异常(血小板系)
7.1 原发性血小板增多症
7.2 出现血小板聚集

目  录

Celltac的白细胞5分类分析

1.

1.1 Celltac的流式细胞术原理

日本光电的Celltac系列血细胞分析仪用红色半导体激光照射白细胞,通过激光散射光检测方法(流式细胞术)分析检测到的散射光,并将白细胞分为中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞五种类型。
散射光的模式可以捕捉到以下3种细胞信息。
● 细胞大小(Size)
● 细胞内部信息(Complexity)
● 颗粒信息(Granularity)
通过流动池周围安装的两个透镜(菲涅耳透镜),可以分为前小角度(FSS),前大角度(FLS)和侧角(SDS)三个方向聚光,并检测出它们各自的散射强度。FSS反映细胞大小(Size),FLS反映细胞内部信息(Complexity),SDS反映颗粒信息(Granularity)(图1)。通过对三束散射光信息进行三维分析,可以明确地将细胞分成五组。

通过无染色方法进行高精度和低成本的白细胞鉴别
Celltac的白细胞5分类能够在尽可能地保持每个细胞在外周血中看到的状态下识别形态特征。由此,它可以获得与生物体内相近的信息。另外,采用流式细胞术同时分析单通道白细胞,实现了在共同环境下进行相对细胞的定量分析。由此,它可以实现以更少的试剂进行高精度的白细胞5分类,并且有助于减轻管理所耗费的精力和降低管理成本。

图1 流动池单元的内部图像

1.2 通过散点图进行的白细胞5分类

散点图是根据从散射光强度中获得的三种细胞形态信息(Size、Complexity、Granularity)而绘制的图,它在如图2所示的三维坐标上标绘出了每个细胞的数据。与二维分析相比,通过使用三维坐标,可以清楚地对各细胞群进行分类,从而能够高精度地进行检测。每个细胞的分布图显示在图3中的三种类型的散点图上。

与目视计算时的参照信息相关的散点图
     由于通过Celltac的流式细胞术检测出的三种细胞形态信息(Size、Complexity、Granularity)与目视计数的判断标准相同,因此可以容易地解读散点图数据。通过参考各细胞群的标绘模式,可以预估是否存在形态异常及其趋势。

图2 散点图显示模式图

三种类型的散点图显示
❶ 主散点图:淋巴细胞/单核细胞+嗜碱性粒细胞/中性粒细胞+嗜酸性粒细胞分类用散点图(Size-Complexity)
❷ NE-EO散点图:中性粒细胞/嗜酸性粒细胞分类用散点图(Size-Granularity)
❸ MO-BA散点图:单核细胞/嗜碱性粒细胞分类用散点图(Size-Granularity)

图3 正常样本的散点图示例

在结合了细胞大小(FSS)与内部信息(FLS)的主散点图中,通常大致显示为2个分布集团(亚群),左侧为LY+MO+BA区域(○),右侧为NE+EO区域(○)。
前者中包含具有弱FLS强度(低复杂性)的淋巴细胞(LY)和单核细胞(MO),后者中包含具有强FLS强度(高复杂性)的嗜中性粒细胞(NE)和嗜酸性粒细胞(EO)2个集团。嗜碱性粒细胞(BA)从单核细胞区域到具有稍高复杂性的区域作图。通常BA为具有分叶核的粒细胞,但由于它具有高度水溶性的颗粒,因此FS强度会降低。

在结合了细胞大小(FSS)与颗粒信息(SDS)的NE-EO散点图中,对于在主散点图上分布重叠的中性粒细胞(NE)和嗜酸性粒细胞(EO)的亚群,可以通过两者的形态特征的差异进行辨别。

❶ 主散点图

❷ NE-EO散点图

在结合了细胞大小(FSS)与颗粒信息(SDS)的MO-BA散点图中,对于在主散点图上分布重叠的单核细胞(MO)和嗜碱性粒细胞(BA)的亚群,可以通过两者的形态特征的差异进行辨别。

❸ MO-BA散点图

1.3 标志与符号标记

数值异常标志
在检测结果中出现以下标志时,意味着相应的参数偏离了标志判断标准值。请通过目视进行检查。

为了进行高精度的筛查,Celltac系列的白细胞5分类模型中标有各种标志和符号标记。本节将对其消息一览表与分别代表的含义进行说明。

※除红细胞指数异常外,可以改变判断标准值。有关设置方法,请参照使用说明书。

图4  标志出现区域

标志   英文名称 表示出的形态异常
原始细胞 Blasts 疑似出现原始细胞
幼稚粒细胞 Immature Gr 疑似出现幼稚粒细胞
向左移 Left shift 疑似中性粒细胞向左移
异型淋巴细胞 Atypical Ly 疑似出现异型淋巴细胞
淋巴细胞 - 单核细胞干扰 Ly-Mo Interference 在主散点图上无法正常区分LY标绘点和MO标绘点时
中性粒细胞 - 嗜酸性粒细胞干扰 Ne-Eo Interference 在NE-EO散点图上无法正常区分NE标绘点和EO标绘点时

形态异常标志
如果在散点图中观察到分布异常,设备会显示相应的标志。各标志出现的区域如图4所示。

其他的异常信息
以下信息表示散点图或直方图的分布异常。

标志   英文名称 信息检测标准
血小板聚集 Plt Clumps 疑似血小板聚集
小有核细胞 Small Nucleated Cell 在光学系统和电气系统之间观察到白细胞计数值有一定程度以上的偏差时
小有核细胞 Poor hemolyzation 在白细胞直方图上识别出一定程度以上的红细胞影时
血小板 - 红细胞干扰 PLT-RBC Interference 当血小板和红细胞的直方图不能明确地分开时

符号标记
当数值数据旁边显示以下符号标记时,表明可能由于检测值异常或机械误差导致数据可靠性低。请考虑各方面因素后作出适当的应对。

数据标示  出现的主要原因 符号标记出现时的应对方法
疑似出现干扰物质或异常细胞 请通过目视进行重新检查
C 疑似血小板聚集 请通过目视进行重新检查
疑似溶血不良或红细胞指数异常 请通过目视进行重新检查
检测出温度异常或测量部位污迹 检查稀释液的温度并进行洗涤操作
H 超过异常判断限值的上限 检查稀释液的温度并进行洗涤操作
L 低于异常判断限值的下限 请根据检查室规程进行确认

[ 注意 ]
  • 上述标志或符号标记的功能都是表示存在异常细胞或异常检测值,并不能用于识别异常细胞或确定疾病名称。
  • 如果检测到某个标志,且数值旁边出现“*”,说明数据可能不可靠。临床上不要使用从仪器获得的数据,请通过目视进行重新检查。

散点图和血细胞形态

2.

2.1 正常样本的测量示例与布局范例

Celltac数据

数值结果                                 散点图                       直方图

出现标志

散点图/直方图的说明
在此处进行散点图和直方图的说明。

涂片类型(染色方法)

涂片的照片

倍率

病例说明
在此处进行病例说明。

目视数据
原始细胞
早幼粒细胞
中幼粒细胞
晚幼粒细胞
条带
Seg
淋巴细胞
异型淋巴细胞
单核细胞
嗜酸性粒细胞
嗜碱性粒细胞
其他
合计
NRBC/100WBC
红细胞/其他观察结果

2.2 造血干细胞的分化和成熟

从造血干细胞到每个血细胞的分化如下所示。同时,一并记载在造血干细胞成熟过程的某个阶段中,通过肿瘤性增殖而发病的白血病及其病例记载页面。

※ 这只是白血病发展阶段的一个示例,实际中并不一定如所描述的一样发展。

白细胞增多

2.

3.1 中性粒细胞增多

Celltac数据

数值结果                                 散点图                       直方图

出现标志

散点图/直方图的说明
在NE-EO散点图的中性粒细胞区域(○)中出现了许多标绘点,表明存在中性粒细胞增多。同时,还出现了表明“中性粒细胞增多”的标志。

目视数据
原始细胞
早幼粒细胞
中幼粒细胞
晚幼粒细胞
条带                        8.0%
Seg                       80.0%
淋巴细胞                 1.0%
异型淋巴细胞
单核细胞               11.0%
嗜酸性粒细胞
嗜碱性粒细胞
其他
合计
NRBC/100WBC
红细胞/其他观察结果

外周血图像
(May-Giemsa染色)

x400

病例说明
观察到分叶核嗜中性粒细胞增加。没有异常发现,特别是发育异常。

3.2 淋巴细胞增多

Celltac数据

数值结果                                 散点图                       直方图

出现标志

散点图/直方图的说明
在主散点图的淋巴细胞区域(○)中出现了许多标绘点,表明存在淋巴细胞增多。同时,还出现了表明“淋巴细胞增多”的标志。

目视数据
原始细胞
早幼粒细胞
中幼粒细胞
晚幼粒细胞
条带                         3.0%
Seg                        17.0%
淋巴细胞                78.0%
异型淋巴细胞
单核细胞                  2.0%
嗜酸性粒细胞
嗜碱性粒细胞
其他
合计
NRBC/100WBC
红细胞/其他观察结果

外周血图像
(May-Giemsa染色)

x400

病例说明
细胞大小为12~15μm,N/C为60~80%,细胞质显示出浅蓝色的成熟淋巴细胞增多。

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